纸色谱法是属于分配色谱的一种,通常用特制的滤纸如新华一号滤纸作为固定相(水的支持剂),含有一定比例的水的有机溶剂(展开相)作流动相,应用于多官能团或高极性化合物如糖或氨基酸的分离、鉴定.
Rf比移值是一个特定常数.Rf值随被分离化合物的结构、固定相与流动相的性质、温度等因素不同而异.当温度、滤纸等实验条件固定时,它是一个常数.这也就是用纸色谱进行定性分析的依据.
用标准氨基酸作出纸色谱和Rf值,与在相同条件下作出的混合物的纸色谱和Rf相对照,以达到分离、鉴定氨基酸的目的.当然,在实际应用中,纸上层析的操作要复杂得多.尤其是Rf值相接近的氨基酸需要用两向纸上层析才能达到分离鉴定的目的.
氨基酸经纸上层析后,常用茚三酮显色剂显色.必须注意!指印含有一定量的氨基酸,在实验方法中足以检出(可以检出以微克计的痕迹量).
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