计算退火温度的方法:
1.退火温度=4×(G+C)+2×(A+T)-(5~8) 只是粗算,有时不灵,但比较简便.
2.用primer5(or oligo6)计算,引物配对好后,primer5可以显示Tm,我认为这个值就是退火温度,我的经验再加2 or 3度最好.
3.合成引物的单子上也有个Tm,减去5~8也可,但有些公司提供的Tm就是方法1计算的.
我认为方法二最准确,不知道还有其他方法吗?
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