试说明分子荧光法的基本原理和影响因素

原理：当一些物质被光照射后,物质的分子吸收光以后,便以基态跃迁到激发态,成为激发分子,然后通过相互碰撞或和其它溶剂分子碰撞等去活化的过程而消耗了能量,回到第一激发态的最低振动能级,这种跃迁称为无辐射跃迁,它不会发光.当电子由激发态的最低振动能级跃迁回基态的不同振动能级时,则以荧光的形态发出能量.
影响因素：（1）发光分子中要具有共轭π键体系.共轭的程度越大,π电子越容易激发,分子放光越容易产生.（2）具有刚性平面结构分子有利于荧光发射分子的共平面越大,其π电子的共轭程度越大.如荧光素和酚酞结构十分相似,荧光素有很强的荧光,而酚酞没有,这是由于荧光素有刚性平面结构,减少了分子振动,减少了去活化的概率.（3）取代基的作用.给电子基增强荧光:－OH, －NH2,－NHR,－NR2,－C≡N；吸电子基减弱荧光：－Br , －Cl , － NO2, －N＝N, －COOH
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