接种
将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.
1、接种工具和方法
在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培养基表面要将菌液均匀涂布时,需要用到涂布棒.
常用的接种方法有以下几种:
1)划线接种 这是最常用的接种方法.即在固体培养基表面作来回直线形的移动,就可达到接种的作用.常用的接种工具有接种环,接种针等.在斜面接种和平板划线中就常用此法.
2)三点接种 在研究霉菌形态时常用此法.此法即把少量的微生物接种在平板表面上,成等边三角形的三点,让它各自独立形成菌落后,来观察、研究它们的形态.除三点外,也有一点或多点进行接种的.
3)穿刺接种 在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法.做穿刺接种时,用的接种工具是接种针.用的培养基一般是半固体培养基.它的做法是:用接种针蘸取少量的菌种,沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺,如某细菌具有鞭毛而能运动,则在穿刺线周围能够生长.
4)浇混接种 该法是将待接的微生物先放入培养皿中,然后再倒入冷却至45°C左右的固体培养基,迅速轻轻摇匀,这样菌液就达到稀释的目的.待平板凝固之后,置合适温度下培养,就可长出单个的微生物菌落.
5)涂布接种 与浇混接种略有不同,就是先倒好平板,让其凝固,然后再将菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布,让菌液均匀分布,就可长出单个的微生物的菌落.
6)液体接种 从固体培养基中将菌洗下,倒入液体培养基中,或者从液体培养物中,用移液管将菌液接至液体培养基中,或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中,都可称为液体接种.
7)注射接种 该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内,如人或其它动物中,常见的疫苗预防接种,就是用注射接种,接入人体,来预防某些疾病.
8)活体接种 活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法,因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖.所用的活体可以是整个动物;也可以是某个离体活组织,例如猴肾等;也可以是发育的鸡胚.接种的方式是注射,也可以是拌料喂养.
实验室常用方法
(一)斜面接种:由已长好微生物的斜面中挑取少量菌种接种至另一空白斜面培养基上.
(1)接种前用记号笔在距试管口2~3cm位置上,注明菌名、接种日期等.
(2)将试管放于手掌中,并用手指夹住,使两支试管呈“V”字形.
(3)用火焰将接种环烧红,然后将接种环来回通过火焰数次.
(4)用小指、无名指和手掌拔下试管塞,并持于手中.
(5)将试管口在火焰上微烧一周.
(6)将烧过的接种环伸入菌种管内,先将环接触一下没有长菌的培养基部分,使其冷却,以免烫死菌体,然后用环在菌苔上轻轻地接触,刮下少许培养物,并将接种环慢慢 的从试管中抽出,并迅速地伸入另一试管中,在斜面上划线(波浪或直线),使菌体沾附在培养基上.
(7)将接种环抽出,灼烧管口.
(8)塞上棉塞.
(9)将接种环经火焰灼烧灭菌.
(二)液体接种:由斜面菌种接种在液体培养基中
(1)接种前用记号笔在距试管口2~3cm位置上,注明菌名、接种日期等.
(2)将试管放于手掌中,并用手指夹住,使两支试管呈“V”字形.
(3)用火焰将接种环烧红,然后将接种环来回通过火焰数次.
(4)用小指、无名指和手掌拔下试管塞,并持于手中.
(5)将试管口在火焰上微烧一周.
(6)参照图(7-1)
(7)将接种环抽出,灼烧管口.
(8)塞上棉塞.
(9)将接种环经火焰灼烧灭菌.
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