据我自己的经验,这种情况往往是由于操作不当引起,可能有如下原因:
1,菌体量可能过大,裂解不充分,或裂解液与中和液比例不适当;(调整菌液量或缓冲液量)
2,混合时过于剧烈,可能会带来基因组DNA片段的污染;(轻柔混合)
3,Rnase失活,可能带来RNA污染;(换Rnase)
4,离心不充分(有絮状物在上层),或在离心后吸取上清时,将沉淀吸入,会带来蛋白质污染.(加大离心时间及转速,操作时避免吸入沉淀或表面絮状物)
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欢迎继续讨论,纯属手打,祝愉快!
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